光吸收遵循的是比尔-朗伯定律（Beer–Lambert law），吸光度=吸光系数*吸收介质的厚度*吸收介质的浓度  即A=abc，其中A为吸光度，a为吸光系数，b为厚度，c为样品的浓度。影响吸光度的因数是b和c。a是与溶质有关的一个常量。

同时，因为仪器都有一个测量上限，很多时候溶液都需要进行稀释。理论上如果都在测量范围内，稀释也没有操作错误，根据不同稀释倍数测试出来的原液结果应该都是一样的。

当一束光通过一个吸光物质（通常为溶液）时，溶质吸收了光能，光的强度减弱。吸光度就是用来衡量光被吸收程度的一个物理量。吸光度用A表示。A=abc，其中a为吸光系数，单位L/(g·cm)，b为光在样本中经过的距离（通常为比色皿的厚度），单位cm，c为溶液浓度，单位g/L。A=Ecl。

浓度使吸光度变化的原理：

符号A，表示物质对光的吸收程度。lg(I0/I1)式中I0是通过均匀的液体介质的一束平行光的入射光的强度；It是透射光强度；T是透射比。A值越大，表示物质对光的吸收越大。

根据比尔定律，吸光度与吸光物质的量浓度c成正比，以A对c作图，可得到光度分析的校准曲线。在多组分体系中，如果各组分的吸光质点彼此不发生作用，那么吸光度便等于各组分吸光度之和，这一规律称吸光度的加和性。